一、高品質發酵罐的滅菌操作

1. 關閉所有供水管路及空氣管路。開啟蒸汽管路閥門。同時稍開啟發酵罐夾套的排氣閥門，排放夾套剩水。

2. 開啟發酵罐攪拌電機，轉速至200rpm，使發酵液受熱均勻。當溫度升到95℃以上時，即可停止攪拌。然后待溫度升至121℃時即可計時開始。

3. 當計時開始后，發酵時間一般為20-30分鐘。在此時間內應保證溫度不低于120℃.同時可進行空氣過濾器及空氣管道的滅菌。

4. 空氣過濾器及空氣管道的滅菌：稍開過濾器的排水閥門，及空氣管道的隔膜閥，保證空氣管道的蒸汽滅菌。但不能開的太大，以免蒸汽大量進入罐內，而稀釋培養基。

5. 出料、采樣閥的蒸汽閥門及出口閥稍開，保證該管路滅菌。在發酵罐的蓋上的接種口，同樣需要放氣，使其達到滅菌要求。

6. 當保溫結束時，應先把空氣管路中的隔膜閥關閉。把空氣過濾器排水閥關閉，以及關閉取樣閥出口閥門和接種口螺帽。然后再關閉各路蒸汽閥門。

二、發酵過程的操作

1. 接種：接種方法可采用火焰接種法或差壓接種法。

火焰接種法：在接種口用酒精火圈，然后打開接種口蓋，迅速將接種液倒入罐內，在把蓋擰緊。

差壓法：在滅菌前放入墊片，接種時把接種口蓋打開，先倒入一定量的酒精。待片刻后把種液瓶的針頭插入接種口的墊片。

2. 罐壓

發酵過程中須手動控制罐壓，即用出口閥控制罐內壓力。調節空氣流量的，須同時調節出口閥，應保持罐內壓力恒定大于0.03Mpa。

3. 溶解的測量和控制

溶解氧的標定：在接種前，在恒定的發酵溫度下，將轉速及空氣量開到**大值時的溶解氧DO值作為100%。

發酵過程的溶解氧DO測量和控制：DO的控制可采用調節空氣流量和調節轉速來達到。簡單是轉速和溶氧的關聯控制。其次則必須同時調節進氣量（手動）控制。有時需要通入純氧（如在某些基因工程菌的高密度培養中）才能達到要求的DO值。